血脉通胶囊对实验性急性心肌缺血的保护作用
【摘要】 目的 研究血脉通胶囊对垂体后叶素致大鼠或小鼠急性心肌缺血的保护作用。方法 制作垂体后叶素致小鼠或大鼠急性心肌缺血模型，比较服用丹参和不同剂量血脉通胶囊对小鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)，肌酸磷酸激酶(CPK)及其同功酶(CK-MB)和大鼠血液动力学的大鼠影响。结果 与模型对照组比较，血脉通各剂量组均可显著降低心肌缺血引起的LDH、CPK及CK-MB含量升高(P<0.01)，使大鼠心脏左室压变化最大速率(±dp/dt max)显著提高(P<0.05)。上述结果与丹参对照组相似。结论 血脉通胶囊对实验性急性缺血具有一定的保护作用。
关键词 血脉通 心肌缺血 小鼠 大鼠 乳酸脱氢酶 肌酸磷酸激酶 同功酶 血液动力学
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2004)12-1076-03
Protective effect of Xue Mai Tong capsule on
, 百拇医药
the experimental acute myocardial ischemia
Zhang Yong，Dai Jianya，Zhang Fanglin，et al.
Department of Pharmacology，Shanghai Second Medical University，Shanghai200025.
【Abstract】 Objective To evaluate the cardiac protective effect and hemodynamic of Xue Mai Tong capsule.Methods (1)Twenty-four SD rats were randomly divided into4groups and were first pretreated with saline or drugs ip for7days，thenretreated by Pituitrin20μ/kg ip.HR，LVEDP and LVSP monitored during the experiments.(2)Forty mice randomly being divided into5groups were first preconditioned with saline or drugs ip for7days，then sacrificed30min after infusion of Pituitrin20U/kg ip.Serum LDH，CPK and CK-MB were determined by using enˉzyme velocity rate method.Results Serum LDH，CPK or CK-MB both in control or in pretreated groups with Xue Mai Tong were significantly lower than that in the group mimicking ischemia(P<0.05);On the effect of hemodiˉnamic，Xue Mai Tong significantly decreased the LVEDP(P<0.05)and reestablished the dp/dt max on the left ventriˉcle pressure of SD rats(P<0.01).Conclusion Xue Mai Tong capsule is able to play a role of protective effect on the experimental acute myocardial ischemia.
, 百拇医药
Key words Xue Mai Tong myocardial ischemia mouse SD rat LDH CPK isoenzymes hemodinamic
血脉通胶囊是在苗族常用并且有效的民族药验方，是由真陆、窝国里、丹参、黄芪、川芎等多味中药组成的复方制剂。临床试验表明，血脉通胶囊对心肌梗死患者胸闷疼痛、心悸气短、倦怠乏力有明显改善作用，治疗前后心电图ST段从压低恢复到基线水平。动物实验显示，血脉通胶囊亦能改善实验性心肌梗死造成的心电图改变。本研究应用垂体后叶素致小鼠或大鼠急性心肌缺血模型 [1] ，观察血脉通胶囊对小鼠血清LDH、CPK、CK-MB和大鼠血液动力学的影响，探讨其对心肌缺血的保护作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SD大鼠200～250g，雌雄兼用，由中科院上海实验动物中心提供，合格证号中科动管第005号。实验动物随机分为4组:模型动物对照组;阳性药对照组以及血脉通高、低剂量试验组，各组动物数均为6只。实验小鼠(昆明小鼠):雌雄兼用，体重(25±2)g，由中科院上海实验动物中心提供(合格证号中科动管第005号)。实验动物随机分为6组:正常动物对照组;模型动物对照组;阳性药对照组以及血脉通高、中、低剂量试验组，各组均为8只。
, 百拇医药
1.2 药物和试剂 垂体后叶素:上海禾丰制药有限公司生产(批号:010501)，丹参:上海中药制药三厂(批号:20011217G)，血脉通胶囊:由贵州益康制药有限公司提供(批号:20000702)，LDH、CPK、CK-MB试剂盒(M-11016):澳大利亚AD公司提供。仪器:离心机(型号TGL-16g)，LX20自动生化分析仪(BECKMAN)，血压记录仪(Powerlab)。
1.3 方法 大鼠:模型动物对照组(简称缺血组)给予生理盐水，阳性对照组给予丹参0.8g/kg，不同剂量试验组分别给予血脉通胶囊0.5g/kg1g/kg。每组动物连续灌胃7天。第7天灌胃1h后，开始麻醉(20%乌来糖5ml/kg)，由大鼠颈总动脉插管至左心室腔内，接上心电图机、电脑，观察并记录心室内压及Ⅱ导联心电图的正常情况。然后腹腔注射垂体后叶素20U/kg，观察记录药后15、30、60min的心率、心室内压的变化。小鼠:正常动物对照组，模型动物对照组给予生理盐水，阳性药对照组给予丹参2g/kg，不同剂量试验组分别给予血脉通胶囊0.5、1、2g/kg，各组均连续灌胃7天。除正常对照外，其余各组于第6、7天灌胃45min后，腹腔注射垂体后叶素20U/kg，第7天腹腔注射垂体后叶素30min后断头取血，将所取血离心1000g/min，10min，抽取上清液待测。用酶速率法测定LDH，CPK，CK-MB，酶活力以U/L表示。
, 百拇医药
1.4 统计学方法 数据均以ˉx±s表示，统计分析采用单因素方差分析(ANOVA)，各组间比较采用Student′s t检验。
2 结果
2.1 血脉通胶囊对大鼠心肌缺血血液动力学的影响 表1 结果显示，心肌缺血后左室舒张末压(LVEDP)升高，与缺血组比较，丹参和血脉通可明显降低LVEDP;左室收缩压(LVSP)在缺血时明显降低，血脉通明显改善心肌缺血不同时间的LVSP，显著提高不同时间的±dp/dtmax，而且这一作用在大剂量血脉通时尤为明显(P<0.01)。
2.2 血脉通胶囊对小鼠血清LDH含量的影响 表2结果显示，模型动物对照组LDH含量较正常对照组明显升高，而不同剂量血脉通组和丹参组均较模型对照组显著降低 (P<0.01)。提示血脉通胶囊对垂体后叶素致小鼠急性心肌缺血有一定保护作用，其中以中剂量组作用最为明显(P<0.05)。
, 百拇医药
2.3 血脉通胶囊对小鼠血清CPK及CK-MB含量的影响 表2结果显示，模型动物对照组CPK及CK-MB含量较正常对照组明显升高，而不同剂量血脉通组和丹参组均较模型对照组显著降低(P<0.01)。提示血脉通胶囊对垂体后叶素致小鼠急性心肌缺血有一定保护作用，其中以中剂量组作用最为明显(P<0.05)。
表1 血脉通对实验性大鼠心肌缺血的血液动力学影响
表2 血脉通胶囊对小鼠血清LDH，CPK和CK-MB活力的影响
注:(1)正常组，试验组与模型组比较: △ P<0.05， △△ P<0.01;(2)试验组与丹参组比较 # P<0.05， ## P<0.01;(3)试验组各剂量比较 ▲ P<0.05， △▲ P<0.01
3 讨论
采用垂体后叶素致急性心肌缺血是目前评价抗心肌缺血药作用的常用模型 [2] 。较模型对照组，垂体后叶素能收缩外周动脉，特别是冠状动脉使心肌缺血损伤，心肌细胞膜通透性改变，细胞内LDH、CPK、CK-MB漏出，血中水平增高。血清LDH、CPK、CK-MB含量是临床诊断心肌梗死的常用生化指标，尤其CK-MB由于其心肌特异性，已公认为急性心肌梗死诊断较敏感指标。实验表明，上述三项生化指标在服用血脉通尤其中剂量后都明显降低，表明，血脉通对心肌损伤具有一定的保护作用。
, 百拇医药
心脏在压力作用下，具有容积改变的的特性，称顺应性。心肌缺血后的表现之一，就是顺应性降低，LVEDP升高，灌流压降低 [3] 。本实验结果表明，血脉通显著降低大鼠缺血心脏的LVEDP，并改善心肌缺血时的左室收缩压 (LVSP)，提高左室压变化最大速率(±dp/dtmax)，该作用在大剂量时尤为明显。由于心肌缺血与心脏舒缩功能下降有密切的关系，而补心气药物多具有改善心脏舒缩功能的作用，提高心脏顺应性或减少心脏的耗氧。上述实验结果提示血脉通对保护心肌再灌注损伤具有一定作用。
参考文献
1 黄河清，吴伟康.保心胶囊对大鼠急性心肌缺血及血液流变性的影响.中成药，2000，22(4):285-287.
2 王波，陈修.抗心肌缺血药实验方法述评.药学通报，1987，22(10):583-585.
3 Laude K，Thuillez C，Richard V.Coronary endothelial dysfuction after ischemia and reperfusion:a new therapeutic target?Braz J Med Biol Res，2001，34(1):1-7.
作者单位:200025上海第二医科大学药理教研室(通讯作者)
江西医学院药理教研室
(编辑守 中), 百拇医药
关键词 血脉通 心肌缺血 小鼠 大鼠 乳酸脱氢酶 肌酸磷酸激酶 同功酶 血液动力学
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2004)12-1076-03
Protective effect of Xue Mai Tong capsule on
, 百拇医药
the experimental acute myocardial ischemia
Zhang Yong，Dai Jianya，Zhang Fanglin，et al.
Department of Pharmacology，Shanghai Second Medical University，Shanghai200025.
【Abstract】 Objective To evaluate the cardiac protective effect and hemodynamic of Xue Mai Tong capsule.Methods (1)Twenty-four SD rats were randomly divided into4groups and were first pretreated with saline or drugs ip for7days，thenretreated by Pituitrin20μ/kg ip.HR，LVEDP and LVSP monitored during the experiments.(2)Forty mice randomly being divided into5groups were first preconditioned with saline or drugs ip for7days，then sacrificed30min after infusion of Pituitrin20U/kg ip.Serum LDH，CPK and CK-MB were determined by using enˉzyme velocity rate method.Results Serum LDH，CPK or CK-MB both in control or in pretreated groups with Xue Mai Tong were significantly lower than that in the group mimicking ischemia(P<0.05);On the effect of hemodiˉnamic，Xue Mai Tong significantly decreased the LVEDP(P<0.05)and reestablished the dp/dt max on the left ventriˉcle pressure of SD rats(P<0.01).Conclusion Xue Mai Tong capsule is able to play a role of protective effect on the experimental acute myocardial ischemia.
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Key words Xue Mai Tong myocardial ischemia mouse SD rat LDH CPK isoenzymes hemodinamic
血脉通胶囊是在苗族常用并且有效的民族药验方，是由真陆、窝国里、丹参、黄芪、川芎等多味中药组成的复方制剂。临床试验表明，血脉通胶囊对心肌梗死患者胸闷疼痛、心悸气短、倦怠乏力有明显改善作用，治疗前后心电图ST段从压低恢复到基线水平。动物实验显示，血脉通胶囊亦能改善实验性心肌梗死造成的心电图改变。本研究应用垂体后叶素致小鼠或大鼠急性心肌缺血模型 [1] ，观察血脉通胶囊对小鼠血清LDH、CPK、CK-MB和大鼠血液动力学的影响，探讨其对心肌缺血的保护作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SD大鼠200～250g，雌雄兼用，由中科院上海实验动物中心提供，合格证号中科动管第005号。实验动物随机分为4组:模型动物对照组;阳性药对照组以及血脉通高、低剂量试验组，各组动物数均为6只。实验小鼠(昆明小鼠):雌雄兼用，体重(25±2)g，由中科院上海实验动物中心提供(合格证号中科动管第005号)。实验动物随机分为6组:正常动物对照组;模型动物对照组;阳性药对照组以及血脉通高、中、低剂量试验组，各组均为8只。
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1.2 药物和试剂 垂体后叶素:上海禾丰制药有限公司生产(批号:010501)，丹参:上海中药制药三厂(批号:20011217G)，血脉通胶囊:由贵州益康制药有限公司提供(批号:20000702)，LDH、CPK、CK-MB试剂盒(M-11016):澳大利亚AD公司提供。仪器:离心机(型号TGL-16g)，LX20自动生化分析仪(BECKMAN)，血压记录仪(Powerlab)。
1.3 方法 大鼠:模型动物对照组(简称缺血组)给予生理盐水，阳性对照组给予丹参0.8g/kg，不同剂量试验组分别给予血脉通胶囊0.5g/kg1g/kg。每组动物连续灌胃7天。第7天灌胃1h后，开始麻醉(20%乌来糖5ml/kg)，由大鼠颈总动脉插管至左心室腔内，接上心电图机、电脑，观察并记录心室内压及Ⅱ导联心电图的正常情况。然后腹腔注射垂体后叶素20U/kg，观察记录药后15、30、60min的心率、心室内压的变化。小鼠:正常动物对照组，模型动物对照组给予生理盐水，阳性药对照组给予丹参2g/kg，不同剂量试验组分别给予血脉通胶囊0.5、1、2g/kg，各组均连续灌胃7天。除正常对照外，其余各组于第6、7天灌胃45min后，腹腔注射垂体后叶素20U/kg，第7天腹腔注射垂体后叶素30min后断头取血，将所取血离心1000g/min，10min，抽取上清液待测。用酶速率法测定LDH，CPK，CK-MB，酶活力以U/L表示。
, 百拇医药
1.4 统计学方法 数据均以ˉx±s表示，统计分析采用单因素方差分析(ANOVA)，各组间比较采用Student′s t检验。
2 结果
2.1 血脉通胶囊对大鼠心肌缺血血液动力学的影响 表1 结果显示，心肌缺血后左室舒张末压(LVEDP)升高，与缺血组比较，丹参和血脉通可明显降低LVEDP;左室收缩压(LVSP)在缺血时明显降低，血脉通明显改善心肌缺血不同时间的LVSP，显著提高不同时间的±dp/dtmax，而且这一作用在大剂量血脉通时尤为明显(P<0.01)。
2.2 血脉通胶囊对小鼠血清LDH含量的影响 表2结果显示，模型动物对照组LDH含量较正常对照组明显升高，而不同剂量血脉通组和丹参组均较模型对照组显著降低 (P<0.01)。提示血脉通胶囊对垂体后叶素致小鼠急性心肌缺血有一定保护作用，其中以中剂量组作用最为明显(P<0.05)。
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2.3 血脉通胶囊对小鼠血清CPK及CK-MB含量的影响 表2结果显示，模型动物对照组CPK及CK-MB含量较正常对照组明显升高，而不同剂量血脉通组和丹参组均较模型对照组显著降低(P<0.01)。提示血脉通胶囊对垂体后叶素致小鼠急性心肌缺血有一定保护作用，其中以中剂量组作用最为明显(P<0.05)。
表1 血脉通对实验性大鼠心肌缺血的血液动力学影响
表2 血脉通胶囊对小鼠血清LDH，CPK和CK-MB活力的影响
注:(1)正常组，试验组与模型组比较: △ P<0.05， △△ P<0.01;(2)试验组与丹参组比较 # P<0.05， ## P<0.01;(3)试验组各剂量比较 ▲ P<0.05， △▲ P<0.01
3 讨论
采用垂体后叶素致急性心肌缺血是目前评价抗心肌缺血药作用的常用模型 [2] 。较模型对照组，垂体后叶素能收缩外周动脉，特别是冠状动脉使心肌缺血损伤，心肌细胞膜通透性改变，细胞内LDH、CPK、CK-MB漏出，血中水平增高。血清LDH、CPK、CK-MB含量是临床诊断心肌梗死的常用生化指标，尤其CK-MB由于其心肌特异性，已公认为急性心肌梗死诊断较敏感指标。实验表明，上述三项生化指标在服用血脉通尤其中剂量后都明显降低，表明，血脉通对心肌损伤具有一定的保护作用。
, 百拇医药
心脏在压力作用下，具有容积改变的的特性，称顺应性。心肌缺血后的表现之一，就是顺应性降低，LVEDP升高，灌流压降低 [3] 。本实验结果表明，血脉通显著降低大鼠缺血心脏的LVEDP，并改善心肌缺血时的左室收缩压 (LVSP)，提高左室压变化最大速率(±dp/dtmax)，该作用在大剂量时尤为明显。由于心肌缺血与心脏舒缩功能下降有密切的关系，而补心气药物多具有改善心脏舒缩功能的作用，提高心脏顺应性或减少心脏的耗氧。上述实验结果提示血脉通对保护心肌再灌注损伤具有一定作用。
参考文献
1 黄河清，吴伟康.保心胶囊对大鼠急性心肌缺血及血液流变性的影响.中成药，2000，22(4):285-287.
2 王波，陈修.抗心肌缺血药实验方法述评.药学通报，1987，22(10):583-585.
3 Laude K，Thuillez C，Richard V.Coronary endothelial dysfuction after ischemia and reperfusion:a new therapeutic target?Braz J Med Biol Res，2001，34(1):1-7.
作者单位:200025上海第二医科大学药理教研室(通讯作者)
江西医学院药理教研室
(编辑守 中), 百拇医药